目的:通过比较几种肝脏淋巴细胞分离方法得到的总淋巴细胞、T细胞、自然杀伤T细胞(NKT cells)及自然杀伤细胞(NK细胞)的比例和细胞绝对数,明确各种方法的适用范围。方法:按照析因设计,将不放血(A法)、摘眼球放血(B法)、体循环灌流(C法)、摘眼球结合体循环灌流(B法+C法)4种肝脏预处理方法和单浓度离心法(Ⅰ法)、非连续密度梯度离心法(Ⅱ法)2种Percoll分离方法进行全面组合,共获得8种组合条件,分离小鼠肝脏淋巴细胞,用流式细胞术检测各类型细胞比例。结果:肝脏预处理方法中B法+C法获得淋巴细胞比例最高,A法获得淋巴细胞绝对数最高,B法获得的NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均最高;Ⅱ法获得的淋巴细胞、T细胞、NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均高于Ⅰ法。对于NKT细胞比例和NK细胞绝对数,肝脏预处理方法和Percoll浓度之间有交互作用(P0. 01和P0. 05),其他均无交互作用(0. 05)。结论:采用摘眼球放血结合体循环灌流法,结合Percoll非连续密度梯度法(33%+70%),可获得较高数量和比例的固有免疫细胞,有助于对肝脏固有免疫细胞如NKT细胞、NK细胞等的研究。

目的：利用产单核细胞李斯特菌(LM)感染BALB/c小鼠模型，研究LM感染对小鼠脾脏树突状细胞(DC)亚群及表型变化的影响。方法：LM尾静脉感染BALB/c小鼠，感染后第3、5、7天取小鼠脾脏，平板稀释法进行脾脏细菌载量分析；流式细胞术检测脾脏DC亚群及DC相关表面分子CD80、CD86的表达情况。结果：感染小鼠脾脏细菌载量感染后第3天有高水平的菌落形成单位计数，随着时间的推移细菌的数量迅速降低，直到第7天基本被清除；CD11c+DC的数量在感染第5天高于对照组(P0.05)，CD4+DC的数量在感染后第5天和第7天均高于对照组(P0.05)，CD8+DC的数量在感染后第3、5和7天及CD4-CD8-DC的数量在感染后的第3和第5天亦均高于对照组(P0.05～P0.01)；LM感染后，DC表面CD80和CD86的表达增加，均于感染后第3天和第5天显著高于对照组(P0.01)。结论：LM感染早期，小鼠脾脏DC亚群出现的增殖和成熟表型特征性分子表达上调，决定了其在细胞免疫应答活化中的作用地位。